質粒抽提過程中有很多步驟會影響/后的產量和質量，那么如何評估質粒DNA的產量和質量呢？
目使用分光光度法定量質粒DNA和通過瓊脂糖凝膠電泳進行質粒DNA產率和質量的分析是兩種常用的方法。
溶液中的核酸濃度可通過260 nm的吸光度方便地進行計算。A260的數值處于0.1至1.0之間時測量結果具有良好的重復性，但當A260數值小于0.1或大于1.0的時候，結果的可重復性將顯著下降。而且，3.0以上的讀值是無法使用的，它可能會潛在導致對DNA質量的低估。因此，為了獲得可靠的DNA分光光度定量結果，A260的讀值需要處于0.1至1.0之間。當檢測小量DNA時，使用瓊脂糖凝膠電泳進行的定量分析可能更為可靠。
造成較低的產率和質量的可能因素有很多。為了確定存在問題的環節，可于每一純化步驟都保留一小部分樣品，并通過瓊脂糖凝膠電泳進行分析。
制備樣本
如各個實驗方案和下列表格中所示，從澄清裂解液（樣本1）、流出液（樣本2）、QC洗滌緩沖液的混合組分（樣本3）和QF/QN緩沖液洗脫產物（樣本4）中各取出部分樣品。使用1倍體積的異丙醇沉淀核酸，并使用70%的乙醇洗滌該沉淀，充分蒸干后重懸于10 µl pH8.0的TE緩沖液中。
樣本實驗方案步驟 MidiMaxiMegaGiga（低拷貝數質粒/科斯質粒） QIAGEN-tip 100（低拷貝數質粒/科斯質粒）QIAGEN-tip 5001240 µl120 µl120 µl75 µl600 µl750 µl2240 µl120 µl120 µl75 µl50 µl24 µl3400 µl240 µl160 µl120 µl200 µl120 µl4100 µl60 µl22 µl20 µl50 µl30 µl(制備產物占樣本量的百分比)2%0.40%0.08%0.02%1%0.20%
瓊脂糖凝膠分析
在1%的瓊脂糖凝膠中，對于各個質粒純化步驟中的對應樣品各加入2 µl進行電泳。
原創作者：上海遠慕生物科技有限公司
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