常用
抗體標記熒光染料的選擇
隨著免疫熒光技術的不斷發展，熒光染料及其標記的抗體偶聯物也被廣泛的應用于生物學實驗中。目前，市場上抗體及
蛋白標記的熒光染料主要有CFTM系列（BIOTIUM, USA）； Alexa Fluor®系列 （Life technology, USA）； DyLight系列；Cy系列； IR Dye系列等等。使用*多的為AlexaFluor®系列和CFTM系列。
CFTM系列染料的核心對比AlexaFluor®系列具有以下幾點優勢：
1. 新型羅丹明核心
羅丹明染料以優異的耐光性和良好的熒光量子產量著稱。因此很多Alexa Fluor® 染料具有羅丹明核心結構，但是，傳統羅丹明的化學結構很難從長波長的熒光染料延伸至遠紅外區域甚至是更具挑戰性的近紅外區域，而且生物偶聯后其水溶性并不理想。Biotium 科學家發現從綠色到近紅外多色熒光的羅丹明染料的新型化學方法。該方法被有效的應用于CF染料的產品中，尤其是遠紅外CF染料，而且通過這種方法制備的染料不僅水溶性極佳而且耐光性極好。
2. 特異性高的近紅外染料
近紅外染料的特點是比可見光范圍要大很多，大滴的染料常會導致染料水溶性低、染料聚合體多、熒光量子產量差等問題。為了解決這些問題，許多商用的近紅外染料比如Alexa Fluor®、 DyLight® dyes 和 IRDyes®近紅外染料，在制備時吸附了大量的帶負電荷的磺化基團，其磺化作用可以在一定程度上會提高染料的溶解性和熒光性，但這樣也帶來了另一些更加嚴重的問題，經這種染料標記的生物耦聯物的非特異性結合。例如：與大量負電荷結合后可以顯著的改變抗體的等電點，進而影響抗原抗體的特異性結合反應。綜合以上內容，Biotium 的科學家用革命性的方法設計出近紅外染料C F，在避免引入大量負電荷的情況下，極大的保證了染料優異的理化特性。Biotium 近紅外的CF 染料以花青或羅丹明染料為核心結構，該核心結構的特殊化學修飾限制了染料的分子內位移，從而獲得染料的高量子產率和更好的水溶性。因此，近紅外CF染料比其他近紅外染料熒光強度更高，光穩定性好。*重要的是，在免疫印跡實驗上應用近紅外CF染料標記蛋白質樣品相對于其他商業用近紅外染料制備的抗體偶聯物，限度的提高了信噪比。
3. 優異的標記效率
生物偶聯后的活性染料一般很容易水解，會在運輸，操作及儲存中帶來諸多不便，*終致染料結合效率低下。像Alexa Fluor® dyes,DyLight? dyes ａnd IRDyes®等嚴重的磺化作用有較強的吸濕性，惡化水解作用等問題。例如： AlexaFluor® 488 在應用時琥珀酰亞胺脂酯 SE 活性部分遠低于50%（AlexaFluor488微量標記
試劑盒產品信息，Invitrogen）。相反，所有Biotium 的CF染料具有相對穩定的胺活性的SE基團型，這比大部分AlexaFluor 染料的SE更耐水解。總體來說，CF染料SE產品一貫的給出更高的標記效率，提供給用戶更好的使用價值。
原創作者：上海遠慕生物科技有限公司
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