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技術(shù)文獻(xiàn)

牛血清培養(yǎng)中為什么會有黑點(diǎn)生成?
閱讀次數(shù)：1582 發(fā)布時間：2020/6/28 10:27:48

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牛血清培養(yǎng)中為什么會有黑點(diǎn)生成你了解嗎,我司經(jīng)過詳細(xì)分解，得出以下結(jié)論，為防止客戶由于操作方面而使黑點(diǎn)生成的辦法。對此一定要做好以下幾點(diǎn)。方可使細(xì)胞培養(yǎng)順利。

（1）盡可能地減少血清凍融次數(shù)。

（2） 培養(yǎng)基無需 37℃水浴。

（3）培養(yǎng)基保持PH 值 7.0- 7.2。

（4）嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗。

（5）掌握細(xì)胞傳代的時機(jī)，細(xì)胞切勿生長過老。

1、化凍將血清從-20 度冰箱中取出，室溫（或浸于自來水中）化凍（約需要 30 分鐘至 2 小時，也可放于 4 度冰箱化凍過夜；化凍后若不馬上滅活，可以放入 4 度冰箱中暫時保存）

2、滅活

（1）放入室溫的水浴鍋內(nèi)開始加熱（同時放入一個空的血清瓶，內(nèi)裝 100ml 自來水，插入一根溫度計，溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn)）

（2）當(dāng)溫度計顯示 56 度時，停止加熱，改為間斷加熱，維持 56 度（±0.5 度）30 分鐘（±3 分鐘；若不小心使溫度上升超過 56 度，則：若仍未超過 60 度，且時間很短，比如不超過 5 分鐘，則仍可使用；若超過 60 度，或者時間較長，則棄去不用，或者嘗試用于一些普通細(xì)胞的培養(yǎng)）

（3）取出，自然冷卻至室溫（約需 1-3 小時），可分裝或-20 度繼續(xù)凍存。

3、分裝

（1）轉(zhuǎn)入無菌間，在超凈臺內(nèi)將血清分裝入 10ml 離心管中（注意預(yù)先要將血清輕輕搖動數(shù)周、混勻；用吸液管或吹大管吹出血清時要注意：不要吹出氣泡（血清很粘稠，很容易產(chǎn)生氣泡；如果產(chǎn)生氣泡，則在酒精燈火焰上過一下））

（2）放入-20 度冰箱凍存

（3）全部操作約需要 4-6 小時

原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司