技術文獻
實驗概要
速凍，是將樣品快速用干冰或液氮保存于-70°C或更低的溫度中。速凍能夠達到和緩慢控速冷凍相同的目的，效果大約為 -10-1000°C/min，但達不到-1°C /分鐘。用CoolRack?液速凍樣本能夠保持樣本體積的穩定、組織結構完整、恒定的凍結參數，快速免提樣本是能避免丟失或污染的樣品。在預冷CoolRack的提下進行速凍，這能確保傳熱快。這種方法可以提供優良的標本的完整性和各類分析選擇，包括在研究和診斷中蛋白質、DNA和RNA的提取。本實驗提供長時間冷凍細菌的常規方法。
主要試劑
細菌樣品
冷凍保護劑
TrueCoolTM冷凍管
主要設備
CoolBoxTM CFT30
CoolRack? CFT30
CoolRack?的CF
Cryolabels和/或cryomarkers
ThermalTrayHP平臺（可選）
CoolSinkTM BX50（可選）
37℃水浴鍋
-80℃冷凍冰箱
實驗步驟
細菌樣品的準備
遵照細菌的生長和制備實驗室的方法。
參照CDC（疾病控制和預防中心）的指導方針，特定病原體利用BSL標準（生物安全等）。病原體具有傳染性，應在一個可控和安全的環境中操作。
細菌凍結
1．一般規則情況下，將制備的樣品保持在4°C。
2．將準備好的細菌樣品中加入無菌甘油，使得樣品中甘油濃度為15-50％V/V。然后取1mL（或所需體積）分裝于預先標記的TrueCool凍存管中。為了避免降低滴度，減少滴度將凍存管保持在CoolBox里CoolRackCFT30中，維持4°C。 CoolRackCFT30能降低由于單手開關瓶蓋，造成的污染和泄漏事故。
3．當細菌樣品在CoolRackCFT30維持4°C時，將 CoolRackCF于干冰上平衡10分鐘。
4．將冷凍樣品轉移到一個儲物盒，并放置在-80°C冰箱長期存放。
細菌解凍
1．將冷凍樣品從-80℃冰箱中拿出，放置于-12°C 的CoolBoxCFT30冷凍墨盒里，這樣可以保持合適的溫度和安全的傳遞樣品。
2．將凍存管放置在37℃水浴瓶中，慢慢幌動小瓶，使其凍融。在整個液體完全解凍，將凍存管從37°C水浴瓶中拿出放在一個已經在冰上平衡過的CoolRackCFT30上。樣品準備好可供實驗。
原創作者：上海遠慕生物科技有限公司
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