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實驗方法原理 培養基是人工合成的種混合營養料，用于分離培養細菌。常用的有基礎培養基、營養培養基、鑒別培養基、選擇培養基等。

試劑、試劑盒

牛肉/膏 蛋白胨 氯化鈉 蒸餾水 瓊脂 NaOH 酚紅指示劑

儀器、耗材

pH 試紙 三角燒瓶 量筒 天平 吸管

實驗步驟

1.  稱取牛肉/膏3 g，蛋白胨10 g，氯化鈉5 g 加入1 000 ml 蒸餾水中，加熱溶化。

2.  待冷至40－50℃時，測定并矯正酸堿度為pH7.6。通常未矯正的肉膏湯均呈酸性，故常用1/10 M NaOH 溶液進行矯正。

3.  酸堿度調整后，煮沸3－5 分鐘，補足因蒸發失去的水量，待冷卻后用濾紙使之過濾澄清。并重新測定酸堿度次，若變動較大，應再進行矯正。

4.  按應用時的需要量分裝于適當的試管或燒瓶內，塞上硅膠塞并用牛皮紙包扎，置高壓蒸汽滅菌器內，經103.4 kpa、121.3℃、20 分鐘滅菌。

5.  滅菌后取出培養基，待冷至40℃以下時，放入37℃溫箱24 小時做無菌試驗，如無菌生長，即可備用。
 

眾所周知，培養基是微生物生長、繁殖和代謝的混合營養物質培養基。由于微生物的營養類型不同，對營養物質的要求不同，實驗研究目的不同，所以培養基種類繁多，原料也不同。為了達到實驗和研究的目的，應該按照培養基的配方進行配制。

任何種培養基旦制成，都要及時徹底滅菌，以便進行純培養。培養基培養基滅菌般采用高壓蒸汽。那為什么培養基準備好后定要馬上滅菌呢？

在發酵過程中，培養基滅菌主要有幾個原因如果不滅菌，會因雜菌的消耗而損失生物反應的底物或產物培養基，導致生產能力下降

雜菌還會產生代謝產物，使產品提取更加困難，導致產量較低，產品質量較低

大量雜菌繁殖后，反應液的pH值會發生變化，反應會出現異常

些雜菌會分解產品，使生產失敗培養基

如果出現噬菌體污染，產生細菌的細胞將被裂解，生產將失敗。

培養基的滅菌是為了殺死培養基中的原生菌或附著在空氣中的混合菌培養基，使目標菌更好的生長(減少混合菌對培養基中營養物質的消耗，有些混合菌會抑制你的目標菌的生長)。般來說，培養基人工培養的細菌基本上允許快速生長或盡可能產生代謝產物，因此允許它們在佳培養基上生長，以減少培養時間，提高經濟效益。檢查培養基滅菌效果的方法將培養基放入培養箱中進行培養(時間與培養實驗致，般為24小時)，看滅菌后的培養基菌落即可判斷。

有時候為了更科學的使用培養物，培養基方面培養基會在空氣中被氧化，造成營養物質的流失

另方面，放置會導致細菌繁殖，培養基消耗養分培養基。