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【結締組織染色】彈力纖維與膠原纖維染色實驗
閱讀次數：417 發布時間：2024/8/15 9:35:55

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實驗方法原理	彈力纖維由隨機交聯盤繞的一些肽鏈組成，含有豐富的二硫鍵糖蛋白成分，所以可稱為彈性蛋白。易與染色液中堿基結合，為了能夠更好地顯示彈力纖維和膠原纖維成分，選用維多利亞藍、麗春紅和苦味酸組合雙重染色方法。
實驗材料	石蠟組織切片
試劑、試劑盒	維多利亞藍糊精間苯二酚蒸餾水乙醇三氯化鐵水溶液濃鹽酸苯酚二甲苯中性樹膠
儀器、耗材	60 ℃恒溫箱濾紙
實驗步驟	維多利亞藍染色液：維多利亞藍（Victoria blue）2 g，糊精 0.5 g，間苯二酚 4 g，蒸餾水 200 ml。將上述物質混合后加熱煮沸，邊煮邊攪拌，約 5min。然后用另一容器取 30％三氯化鐵水溶液 25 ml，另行加熱煮沸后慢慢倒入上述混合液中，繼續煮沸 3 min，不斷攪拌溶液呈膠凍狀。去火，冷卻過濾，將濾紙上的殘渣連同濾紙一起放在 60℃ 恒溫箱中烤干。殘渣呈深藍色細顆粒狀粉末，再將其溶于 400 ml 的 70％乙醇液中。然后加濃鹽酸 4 ml 和苯酚 5 g，放置至成熟后使用。 1. 石蠟組織切片，常規脫蠟至水。 2. 切片入 70％乙醇中洗 2 min。 3. 將切片浸入盛有維多利亞藍液中染 2～5 h。 4. 直接入 95％乙醇中分色數鐘。 5. 用蒸餾水洗 2 min。 6. 用麗春紅-苦味酸染色液滴染切片 3 min。 7. 直接用無水乙醇沖洗多余染色液 2 次。 8. 二甲苯透明和中性樹膠封固。
注意事項	1. 維多利亞藍染色液可在室溫中存放較長時間，染色液浸染后倒回原處，可反復使用。 2. 95％乙醇分色后，立即浸入水中，可用顯微鏡觀察染色程度，如果較淺或較深，可再重復染色或分色。
其他	結果：彈力纖維呈藍綠色，膠原纖維呈紅色，背景呈黃色。