詳細內(nèi)容
產(chǎn)品名稱：菠蘿蛋白酶檢測試劑盒(福林微板法)
規(guī)格：50T/100T
供應(yīng)商:遠慕生物
分類：酶類檢測
儲存方式：4℃,避光,6個月
產(chǎn)品用途：主要用于植物組織尤其時菠蘿的勻漿液中菠蘿蛋白酶活性，尤其適用于檢測菠蘿中菠蘿蛋白酶活性
注意事項：檢測原理是通過蛋白酶催化底物酪蛋白，后者水解生成酪氨酸，酪氨酸含有酚羥基，可與福林試劑發(fā)生福林反應(yīng)，即福林試劑在堿性條件下容易定量的被酚類化合物還原，生成鎢藍和鉬藍的混合物，呈現(xiàn)不同深淺的藍色。于酶標儀680nm處檢測吸光度，以吸光度的大小與酪氨酸含量的多少有關(guān)，吸光度大說明酪氨酸含量高，也就是說菠蘿蛋白酶分解的酪蛋白多，酶活性高
試劑注意事項：
①試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
②實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
③使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
④加入試劑的順序一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
⑤按說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
操作注意事項：
1）試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
2）實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3）不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6）洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
7）底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8）加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9）按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
菠蘿蛋白酶檢測試劑盒(福林微板法) 特點：
1.專一性強。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng)，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應(yīng)，顯示抗原與抗體的結(jié)合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應(yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì)，應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進行比色測定，依據(jù)光密度值的變化，可以定量。預(yù)計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行免疫酶技術(shù)的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測，免疫酶技術(shù)都能在較短時間內(nèi)完成。
7.
儀器和試劑簡單。對免疫沒技術(shù)來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊
儀器，所用
儀器及試劑均屬一般性
儀器與試劑，普通實驗室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置.
菠蘿蛋白酶檢測試劑盒(福林微板法) 樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
標簽：
菠蘿蛋白酶檢測試劑盒(福林微板法) 檢測試劑盒
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