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維生素B2檢測試劑盒(熒光光度法)

點擊次數(shù):515  發(fā)布時間:2019/5/29

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公司名稱:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司 型 號: 生產(chǎn)地址:中國大陸 已獲點擊:515 簡單介紹: 維生素B2檢測試劑盒(熒光光度法),維生素B2(核黃素)具有很強的熒光,但易被強酸、強堿易被破壞,核黃素被亞硫酸鹽還原成無色的二氫化物,失去熒光,在激發(fā)光波460nm發(fā)射光波520nm檢測熒光。
詳細(xì)內(nèi)容
產(chǎn)品名稱:維生素B2檢測試劑盒(熒光光度法)
規(guī)格:50T/100T
供應(yīng)商:遠(yuǎn)慕生物
分類:生化檢測
儲存方式:4℃,避光,12個月
產(chǎn)品用途:定量檢測血清、血漿、動植物組織等樣品中的維生素B1(硫胺素)含量
注意事項:維生素B2(核黃素)具有很強的熒光,但易被強酸、強堿易被破壞,核黃素被亞硫酸鹽還原成無色的二氫化物,失去熒光,在激發(fā)光波460nm發(fā)射光波520nm檢測熒光。


試劑注意事項:
①試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
②實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
③使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
④加入試劑的順序一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
⑤按說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。



維生素B2檢測試劑盒(熒光光度法)  常見問題以及解決方法:
1、試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應(yīng)該提前半個小時將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍;
2、加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,然后在進(jìn)行離心處理;
3、洗板時容易造成誤差: 因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動;
4、顯色問題: 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長,都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時候,要先查看顯色劑本身的情況;
5、終止反應(yīng):在加終止劑的時候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽性結(jié)果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒;
6、讀板:讀板的時候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈;
7、嚴(yán)格按照說明書操作。



維生素B2檢測試劑盒(熒光光度法) 操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50?l。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40?l,然后再加待測樣品 10?l。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50?l,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50?l,再加入顯色劑 B50?l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50?l,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。



檢測試劑注意事項:
1.  此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時內(nèi)進(jìn)行實驗,標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。



特點:
1.專一性強。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計進(jìn)行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應(yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計用細(xì)胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進(jìn)行檢測,免疫酶技術(shù)都能在較短時間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術(shù)來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實驗室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置.


原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司


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