詳細內(nèi)容
產(chǎn)品名稱：高鐵血紅蛋白還原檢測試劑盒(微板法)
規(guī)格：50T/00T
供應商:遠慕生物
分類：生化檢測
儲存方式：—20℃,避光,6個月
產(chǎn)品用途：主要用于檢測血清或血漿樣本,亦可用于檢測細胞或組織的裂解液或勻漿液等中的高鐵血紅蛋白還原率。
注意事項：檢測原理是嚴重血管內(nèi)溶血時,結(jié)合珠蛋白與血紅素結(jié)合蛋白均被耗盡,高鐵血紅素與白蛋白結(jié)合成MHA,經(jīng)氧化作用后用酶標儀檢測,若在558nm處出現(xiàn)強的吸收峰,表示存在高鐵血紅素白蛋白
注意事項：
1.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
2.試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
3.使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
4.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
5.洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7.加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
8.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
9.底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
高鐵血紅蛋白還原檢測試劑盒(微板法) 常見問題以及解決方法：
1、試劑的選擇：選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的，但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍；
2、加樣中可能遇到的問題：在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候，會碰到血清血漿不好分離的情況，這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時，然后在進行離心處理；
3、洗板時容易造成誤差： 因為洗板是人工洗的，所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的，這個時候帶有主觀色彩，所以多清洗幾次，還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動；
4、顯色問題： 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長，都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進行顯色反應的時候，要先查看顯色劑本身的情況；
5、終止反應：在加終止劑的時候由于傾倒速度快，差生氣泡，造成假陽性結(jié)果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒；
6、讀板：讀板的時候首先應該保證板的清潔干凈；
7、嚴格按照說明書操作。
高鐵血紅蛋白還原檢測試劑盒(微板法) 操作步驟：
1.編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50?l。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40?l，然后再加待測樣品 10?l。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50?l，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50?l，再加入顯色劑 B50?l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50?l，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
檢測試劑注意事項：
1. 此試劑為體外檢測試劑，效期內(nèi)使用，試劑應視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。
2． 使用前應將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時內(nèi)進行實驗，標本可存放于2～8℃。不需及時實驗，標本-20℃保存，避免反復凍融。
6． 在反復清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后，應注意輕微搖動微孔反應條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內(nèi)標示。
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原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
標簽：
高鐵血紅蛋白還原檢測試劑盒(微板法) 檢測試劑盒
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